Hücre ve Doku Kültürü Teknikleri

Hücre kültürü, hücrelerin kontrollü koşullar altında, genellikle doğal ortamlarının dışında yetiştirildiği süreçtir. İlgili hücreler canlı dokudan izole edildikten sonra, daha sonra dikkatlice kontrol edilen koşullar altında tutulabilirler.

 

Hücre Kültürü nedir?

Hücre kültürü, bir süspansiyon veya bir yapışkan (tek tabakalı) kültür olarak, seçilen hücre tipi için özel olarak seçilen ortamda büyüyen hücreleri içerir. Tipik olarak ortam, amino asitler, glikoz, vitaminler, inorganik tuzlar ve lipitler gibi bileşikler içerecektir. Ayrıca hayvan serumu, büyüme faktörleri, hormonlar, antibiyotikler ve antioksidanlar içerebilirler. Buzağı serumu gibi diğer bileşenlerle desteklenebilen serum bazlı, serumsuz, hayvansız, proteinsiz ve kimyasal olarak tanımlanmış seçenekler dahil olmak üzere çeşitli ortam türleri mevcuttur. Hücreler daha sonra sıcaklık, oksijen ve karbondioksit içeriği gibi optimum hücre büyüme koşullarının korunmasını sağlamak için bir inkübatörde kültürlenir.

 

Kültürlenmiş hücreler, sağlıklı büyümeyi sürdürmek için sürekli bir besin kaynağına ihtiyaç duyar ve bu nedenle besiyerinin düzenli olarak yenilenmesi gerekir. Ek olarak, yapışan hücre çizgilerinin, sürekli büyümeyi sağlamak için mevcut yüzey alanının tamamen kaplandığı nokta olan birleşme noktasına ulaştıklarında alt kültürlenmesi gerekir. Hem ortam değişimi hem de alt kültürleme sırasında kültürün kimyasal veya biyolojik herhangi bir kontaminasyonunu önlemek çok önemlidir.

 

Hücre Kültürü Ne İçindir?

Hücre kültürünün araştırma, biyo-üretim ve teşhis alanında birçok uygulaması vardır. Hayvan, bitki ve bakteri hücre kültürleri, biyolojik süreçleri ve genetiği incelemek ve aşılar, proteinler, enzimler, antikorlar ve hormonlar dahil olmak üzere biyolojik olarak türetilmiş moleküller üretmek için rutin olarak kullanılır. Örneğin, ilaç keşfi ve geliştirilmesinde, memeli hücre kültürleri, hastalığın araştırılması için modeller sağlar ve hedefin tanımlanmasına ve onaylanmasına izin verir. Ayrıca potansiyel yeni ilaçların etkinliğini ve güvenliğini test etmek için yüksek verimli hücre bazlı tarama testlerinde kullanılırlar. Klinik bir ortamda, hücre kültürü teknikleri genellikle bulaşıcı bir hastalıktan sorumlu organizmayı belirlemek ve onu tedavi etmek için en etkili antimikrobiyal maddeleri belirlemek için kullanılır.

 

Hücre Kültürü Tekniği ne işe yarar?

Hücre kültürleri teknikleri, hücresel ve moleküler biyolojide son derece önemli bir araçtır. Araştırmacılara, hücrelerin normal fizyolojisi ve biyokimyasını, ilaçların ve toksik bileşiklerin etkilerini ve mutagenez ve karsinogenezi incelemek için mükemmel model sistemler sağlarlar.

 

Suyun Hücre Kültürüne Etkisi Nedir?

Kontamine kültürler ve hücre ölümü, aşağı yönlü deneyleri olumsuz etkileyebilecek önemli bir sorundur. Su, hücre kültürü işleminin birçok aşamasında kullanılır - tamponların ve ortamın ana bileşenidir ve katkı maddelerinin ve ilaçların çözünmesi için kullanılabilir. Kültürler, kirletici mikroorganizmalardan, biyolojik olarak aktif hücre kalıntılarından ve yan ürünlerden ve organik ve inorganik bileşiklerden olumsuz olarak etkilendiğinden, başarılı deneysel sonuçlar için arıtılmış su kullanımı gereklidir.

 

Saf su kalitesi Hücre Kültürü Sonuçlarını Etkileyebilir?

Hücre kültürü tekniklerinin performansını etkileyen ana safsızlık türleri bakteriler, endotoksinler, organik bileşikler ve iyonik kirleticilerdir.

 

1. Bakteriler

Bakteriler, tipik hücre kültürü koşullarında gelişir ve ilgili hücreleri hızla aşarak besin seviyelerinin düşmesine ve toksik yan ürünlerin artmasına neden olabilir. Bakteriyel kontaminasyon, ortam pH'ında ani değişikliklere ve önceden saf kültürlerin kontaminasyonuna da yol açabilir.

 

2. Endotoksinler

Endotoksinler çoğu Gram-negatif bakteri tarafından salınır. Bu endotoksinler, CD14 endotoksin reseptörlerinden yoksun olanlar da dahil olmak üzere çeşitli hücre tiplerini etkiler ve makrofajları ve mononükleer fagositleri çeşitli pro-enflamatuar sitokinleri serbest bırakmak için uyarır. Ortaya çıkan olumsuz etkiler, hücre büyümesi ve fonksiyonundaki değişiklikleri, rekombinant proteinlerin üretimini ve klonlamanın verimliliğinde bir azalmayı içerir.

 

3. Organik Bileşikler

Hümik asitler, tanenler, böcek ilaçları ve endokrin bozucular gibi suda yaygın olarak bulunan küçük organik bileşikler, hücre gelişimini etkileyebilir. Bakteriyel büyüme için kontrolsüz bir besin kaynağı sağlarlar ve hücre kültürü için materyallerin hazırlanmasında kullanılan sudan çıkarılmalıdırlar.

 

4. İyonlar

İyonik kirleticiler, özellikle çok değerlikli iyonlar ve ağır metaller düşük tutulmalıdır. Ağır metaller - örneğin cıva ve kurşun - çeşitli hücre türleri için sitotoksik olduğu bilinmektedir.

 

Hücre Kültürü İçin Su kalitesi Gereksinimleri Nelerdir?

Uygulamanız için doğru su türünü kullanmak çok önemlidir. Memeli hücre kültürü için su, tipik olarak apirojenik, Tip I ultra saf su gerektirir, ancak Tip II + su, daha az hassas olan bakteri hücre kültürleri için uygundur. Hücrelerin etkili bir şekilde bakteriyel, maya ve viral kontaminantlardan arınmış olmasını sağlamak için ortam ve tamponların hazırlanmasında Tip I su kullanılmalıdır.

 

Uygulama	Resistivity (MΩ.cm)*	TOC (ppb)	Filter (µm)	Bacteria (CFU/ml)	Endotoxins (EU/ml)	Nucleases	Water Grade
Bakteriyel Hücre Kültürü	>1	<50	<0.2	<1	NA	NA	Tip - 2
Memeli Hücre Kültürü	>18	<10	<0.2	<1	<0.002	Not detected	Tip - 1
Bitki doku kültürü	>18	<10	<0.2	<1	<0.002	Not detected	Tip - 1
Histoloji	>1	<50	<0.2	<1	NA	NA	Tip - 2
Topraksız (Hidroponik)	>1	<50	<0.2	<1	NA	NA	Tip - 2

 

 

MEDİPURE, Hücre Kültürü İçin Su Saflığı Sorunlarını Nasıl Çözüyor?

MEDİPURE’nın uzmanlığı ve uzun süredir devam eden itibarı, bilgili ekibinin müşterilerin uygulamaları için gerekli su saflığı seviyesini belirlemelerine yardımcı olabilmesini sağlar. Şirket, hücre kültürü uygulamaları için her birinin kendine özgü avantajları ve sınırlamaları olan bir dizi su arıtma sistemi sunmaktadır. XC Mobil merkezi arıtma ve dağıtım sistemleri serisi, büyük hacimlerde saf suyun laboratuarlarda üretilmesi, depolanması ve dağıtılması biçiminde tasarlanmıştır.

Sonuç

Hücre kültürü, hücresel ve moleküler biyolojide anahtar bir araçtır ve tam su gereksinimleri kültür türüne göre belirlenir. Bakteriyel hücre kültürü için su, en azından Tip II + kalitede olmalıdır, oysa daha hassas memeli hücre kültürü, yüksek dirençli (> 18 MΩ.cm) Tip I ultra saf su gerektirir ve esasen bakteri, endotoksin ve diğer kirleticilerden arındırılmıştır.

 

MEDİPURE’nın geniş su arıtma sistemleri yelpazesi, dünya çapındaki laboratuvarların sudaki safsızlıklar konusunda endişelenmeden hücre kültürü tekniklerini gerçekleştirmelerine yardımcı olur.